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产品简介
T4 DNA Ligase (Quick)来源于携带 T4 DNA Ligase 改造基因的大肠杆菌感受态细胞重组表达获得，该酶在ATP 作为辅助因子作用下，可催化 dsDNA 平末端或粘性末端相邻核酸的 5’磷酸末端和 3’羟基末端形成磷酸二酯键。还可修补双链 DNA、双链 RNA 或 DNA/RNA 杂合物上的单链缺口，但不能催化全单链核苷酸连接。
产品特点
5 min 快速连接片段；室温反应；适用于所有常规连接
产品组成
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组 分
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M111 (40,000 U)
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M111 (80,000 U)
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T4 DNA Ligase (Quick) (800 U/μl)
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50 μl
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100 μl
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2 × Quick Ligation Buffer
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500 μl
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1 ml
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产品应用
克隆载体
T/A 克隆
线性 DNA 环化
高通量文库构建
单位定义
在 50 μl 的连接反应体系中，100 ng 的 λDNA-Hind III 分解物在 25℃下反应 30 min 时，有 90%以上的 DNA
片段被连接所需要的酶量定义为 1 个活性单位 (U)。
质量控制
核酸外切酶残留检测：20 U 本品和 0.6 μg λ-Hind III 在 74℃下孵育 1 h，DNA 的电泳谱带不发生变化。
核酸内切酶残留检测：20 μl 反应体系，10 U 本品和 1 μg λDNA，37℃温育 4 h，DNA 的电泳谱带无变化。
RNase 残留检测：
20 U 本品和 1 μg Hela 细胞总 RNA 在 37℃下孵育 30 min，RNA 的电泳谱带不发生变化。
大肠杆菌残留 DNA 残留检测：50 μl 体系中，以 ddH2O 为模板，扩增 E. coli 16s rDNA 基因。30 个循环后
进行 1%琼脂糖凝胶电泳，染色，无扩增条带。
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