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【E208】FEN1

售价
800.0
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产品编号
E208
所属分类
核酸酶
数量
-
+
库存:
999
暂时无货
1
产品描述
说明书
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产品简介

FEN1 是经构建特殊融合表达载体,转化宿主工程菌发酵表达、精制纯化而成,无核酸及核酸酶残留。FEN1 可催化双链 DNA 底物位点 5' DNA flaps 的切割,形成 5'磷酸末端,其切割产物,可以通过 DNA 连接酶连接,以产生双链 DNA。在细胞内,FEN1 是冈崎片段成熟途径的重要参与者,在碱基切除修复中也发挥作用。


产品组成

组分

E208 (1,600 U)

FEN1 (32 U/µl)
50 μl
10 × FEN1 Buffer

2 × 750 μl

储存条件

-20℃保存,于-20 ~ 0℃运输。避免反复冻融。


实验案例

65℃ 孵育 1 h,得到如 Fig.1 所示结果

注:Tatget ssDNA (43 nt): 单链靶标 DNA;UP (26 nt): 5’端 24 nt 与 Tatget ssDNA 上游的 5’端互补,3’端剩余碱基 2 nt 与 Tatget ssDNA 不互补的引物;DP (40 nt): 5’端 21 nt 与 Tatget ssDNA 上游的 5’端不互补,3’端剩余碱基 19 nt 与 Tatget ssDNA 互补的引物。

结论:

由 A 和 B 两组实验结果发现,添加 FEN1 后可特异性切割产生游离的 flap 片段。

质量控制

RNase 残留检测:20 U 本品和 1 μg Hela 细胞总 RNA 37℃下孵育 30 minRNA 的电泳谱带不发生变化。

大肠杆菌残留 DNA 残留检测:50 μl 体系中,以 ddH2O 为模板,扩增 E. coli 16 s rDNA 基因。30 个循环后 进行 1%琼脂糖凝胶电泳,染色,无扩增条带。

关键词:
【E208】FEN1
FEN1
flap 切割
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     【E208】FEN1  

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