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【R111】M-MLV (H-) Reverse Transcriptase II（耐受72℃）
售价
400.0
元
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产品编号
R111
数量
-
+
库存:
999
产品描述
说明书
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客户好评
产品简介
M-MLV (H- ) Reverse Transcriptase II (Moloney Murine Leukemia Virus，莫洛尼鼠白血病病毒)，为 M-MLV (H- ) Reverse Transcriptase (ATG #R101) 改造升级版。该酶是在野生型 M-MLV 逆转录酶基因基础上经过点突变改造，并通过特殊工程菌表达纯化而成，在保留上一代酶活性如依赖于 RNA 的 DNA 聚合酶活性、依赖于 DNA 的 DNA 聚合酶活性、无 RNase H 活性的基础上，又再次提高了逆转录效率和耐热温度，使其逆转录温度可达 72℃，从而增强了对 RNA 复杂二级结构的耐受性。本品具有合成能力高，热稳定性好和半衰期长等特点。与常见的通过删除 RNase H 结构域方法得到的突变体相比，本产品保留了完整的蛋白结构，因此具有与野生型相同的聚合酶活性。
产品优点
❖ 逆转录效率高
❖ 耐热温度高
❖ 保真度高
❖ 耐受复杂二级结构 RNA
❖ 无 RNase H 活性
产品组成
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组分
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R111 (10,000 U)
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M-MLV (H- ) Reverse Transcriptase II (200 U/µl)
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50 μl
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5 × RT Buffer
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500 μl
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储存条件
-20℃保存，于-20 ~ 0℃运输。▲避免反复冻融。
单位定义
以 Poly(rA)·Oligo(dT) 为模板/引物，在 37℃，10 min 条件下，掺入 1 nmol 的 dTTP 为酸不溶性物质所需要的酶量定义为 1 个活性单位 (U)。
质量控制
核酸外切酶残留检测：
200 U 本品和 50 pmol 单链 DNA 底物在 37℃下孵育 16 h，经变性 PAGE 电泳，DNA 电泳谱带不发生变化。
核酸内切酶残留检测：
200 U 本品和 0.5 μg 质粒 DNA 在 37℃下孵育 4 h，经琼脂糖凝胶电泳，质粒的电泳谱带不发生变化。
RNase 残留检测：
200 U 的本品和 1 μg RNA 在 37℃下孵育 30 min，经琼脂糖凝胶电泳，RNA 的电泳谱带不发生变化。
大肠杆菌 DNA 残留检测：
60 U 本品中残留的核酸经 E.coli gDNA 特异性的 qPCR 检测，E.coli 基因组残留低于 10 拷贝。
功能检测：
逆转录体系中加入 200 U 本品，以 1 μg 总 RNA 为模板，Oligo(dT)18 为引物，42℃反应 45 min。取 1/10 cDNA 产物进行 PCR 扩增 VIN 基因。琼脂糖凝胶电泳，EB 染色，可见有单一的 4.6 kb 条带。
产品应用
❖ IVD 分子诊断
❖ RT-qPCR/RT-LAMP/RT-RPA
❖ cDNA 合成及文库构建
❖ 5’RACE
关键词:
【R111】M-MLV (H-) Reverse Transcriptase II
M-MLV(H-)
逆转录酶
反转录酶
cDNA合成
高温逆转录
高温反转录
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