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产品简介
RNase HII 来源于含有 RNase HII 基因与特殊融合标签共表达载体的大肠杆菌 E.coli 重组发酵表达，经过切除特殊融合标签后获得 RNase HII 蛋白。RNase HII 酶在 DNA/RNA 杂交链的单核糖核苷酸残基处从 5′端进行切割，切割后产生一个 5′端磷酸基团和一个 3′端羟基。其对单链 RNA 切割活性极低，且对 dsDNA、ssDNA 无切割活性。该酶在 50°C 到 75°C 间均具有活性，在 70-75℃活性最佳，但其在室温下活性极低。RNase HII 可识别单个核糖核苷酸并进行切割，而 RNase HI 识别四个连续核糖核苷酸；另外，RNase HII 可降解冈崎片段，而 RNase HI 无此活性。
产品组成
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组分
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E207 (250 U)
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E207 (1,000 U)
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RNase HII (5 U/μl)
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50 μl
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200 μl
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10 × HII Reaction Buffer
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2 × 750 μl
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8 × 750 μl
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储存条件
-20℃保存，于-20 ~ 0℃运输。▲避免反复冻融。
质量控制
核酸外切酶残留检测：
200 U 本品和 50 pmol 线性 DNA 底物在 37℃下孵育 16 h，经琼脂糖凝胶电泳，DNA 电泳谱带不发生变化。
核酸内切酶残留检测：
200 U 本品和 0.5 μg 质粒 DNA 在 37℃下孵育 4 h，经琼脂糖凝胶电泳，质粒的电泳谱带不发生变化。
RNase 残留检测：
200 U 的本品和 1 μg 单链 RNA 在 37℃下孵育 30 min，经琼脂糖凝胶电泳，RNA 的电泳谱带不发生变化。
产品应用
❖ LAMP 高灵敏度探针法检测
❖ 切除聚合酶聚合过程中错配形成的核糖核苷酸
❖ 冈崎片段 RNA 部分的降解
❖ 配合 T7 Endo I 可特异切割嵌入有核糖核苷酸的 dsDNA，造成双链断裂
注意事项
1. 该酶在 50-75℃均有活性，其用量可根据不同的应用进行调节。
2. 该酶与绝大多数的 PCR，LAMP 等缓冲体系兼容，对 Mg2+ 浓度要求也比较宽泛，在 1 ~6 mM 之间均可发挥活性。
3. 该酶极其耐热，95℃ 15 min 活性无明显降低，故不可通过热失活，0.1% SDS 可将其失活。
关键词:
RNase HII
LAMP
上一个
【E203】RNase A
下一个
【E208】FEN1
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