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RNase III来源于含有RNase III基因与特殊融合标签共表达载体的大肠杆菌E.coli重组发酵表达,经过切除特殊融合标签后获得 RNase III 蛋白,在 Mn2+存在条件下,可特异性识别切割双链 RNA (dsRNA),形成5’端磷酸化和3’端羟基末端2个碱基游离的18-25 bp剪切产物 (siRNA)。

组 分 |
E206(1000U) |
RNase III (2 U/μl) |
500 μl
|
10 × Reaction Buffer |
1 ml |
10 × EDTA (500 mM) |
1 ml |
MnCl2 (200 mM) |
1 ml |
-20℃保存,于-20 ~ 0℃运输。▲避免反复冻融。
1.除去 mRNA 疫苗生产过程中残留过多的 dsRNA;
2.哺乳动物细胞中的 RNA 干扰实验;
3.靶标验证。
2.哺乳动物细胞中的 RNA 干扰实验;
3.靶标验证。
核酸外切酶残留检测:200 U 本品和 50 pmol 线性 DNA 底物在 37℃下孵育 16 h,经琼脂糖凝胶电泳,DNA 的电泳谱带不发生变化。
核酸内切酶残留检测:200 U本品和0.5 μg质粒DNA在37℃下孵育4 h,经琼脂糖凝胶电泳,质粒的电泳谱带不发生变化。
RNase 残留检测:200 U的本品和1 μg单链RNA在37℃下孵育30 min,经琼脂糖凝胶电泳,RNA的电泳谱带不发生变化。
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