生物试剂
【E302-2】Exonuclease III (Exo III)（Glycerol-Free）
产品简介
Exonuclease III (Exo III) (Glycerol-Free) 是 Exonuclease III (Exo III ) 无甘油版，来源于 E.coli，是一种 3' 到 5' 的核酸外切酶，可以从平末端、5'-突出端或缺口处降解 dsDNA，从 DNA 链的 3'-端逐步释放 5'-单核 苷酸，产生单链 DNA 片段。其在 DNA 3'-突出端 (至少四个碱基长，且不带有 3'-末端 C-残基) 、单链 DNA 或硫代磷酸酯连接的核苷酸上不具活性。Exo III 还具有以下三种酶活性，如下：
3'-磷酸酶活性：切除 3'-末端的磷酸基团，产生 3'-OH 基团；
RNase H 活性：以核酸外切方式降解 RNA-DNA 杂交体中的 RNA 链；
AP-内切核酸酶活性：切割脱嘌呤或脱嘧啶位点(AP 位点)的磷酸二酯键，产生 5'-端无碱基的脱氧核糖 5'-磷酸残基。
本制品可与本公司等温扩增系列产品同步使用。
产品应用
非定向巢式缺失
定点突变
链特异性探针的制备
制备用于双脱氧测序的单链底模板
产品组成
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组 分 |
E302-2 |
| Exonuclease III （Exo III）(Glycerol-Free ) (100 U/μl) | 25 μl |
|
10×Exo III Buffer |
250 μl |
储存条件
-20℃保存，于-20 ~ 0℃运输。▲避免反复冻融。
质量控制
核酸外切酶残留检测：20 U 本品和 0.6 μg λ-Hind III 在 74℃下孵育 1 小时，DNA 的电泳谱带不发生变化。
核酸内切酶残留检测：20 μl 反应体系，10 U 本品和 1 μg λDNA，37℃温育 4 h，DNA 的电泳谱带无变化。
RNase 残留检测：20U 本品和 1 μg Hela 细胞总 RNA 在 37℃下孵育 30min，RNA 的电泳谱带不发生变化。
大肠杆菌残留 DNA 残留检测：50 μl 体系中，以 ddH2O 为模板，扩增 E. coli 16 s rDNA 基因。30 个循环后进行 1%琼脂糖凝胶电泳，染色，无扩增条带。
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