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【RM101】T7 RNA Polymerase

售价
580.0
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产品编号
RM101
所属分类
mRNA疫苗用酶
数量
-
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库存:
999
暂时无货
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产品描述
说明书
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T7 RNA Polymerase来自重组E.coli BL21菌株发酵表达纯化,无内源核酸残留、无内外切酶残留污染。该酶对T7噬菌体启动子(TAATACGACTCACTATAG)具有高度的特异性,并以其作为启动子,DNA作为模板体外合成正义链或反义链 RNA。双链线性平末端或 5突出末端DNA均可作为T7 RNA Polymerase的底物模板,因此线性质粒、PCR产物均可用作体外合成 RNA 的模板。

产品优点:转录效率高、合成RNA类型多样、RNase污染控制严格。

产品性能:参照非修饰RNA合成反应体系及实验流程,向反应体系中加入Template DNA (1.4 kb) 500 ng37℃孵育2 h,转录合成RNA ,得到RNA产物经DNase I处理后,通过变性琼脂糖凝胶电泳检测,并在NanoDrop™分光光度计上定量得出RNA产物达到300 μg左右,检测结果如图1所示。

 

mRNA 疫苗制备

单链 RNA 转录合成

制备放射标记的 RNA 探针

合成用于体外转录和微量注射的 mRNA

合成用于结构及功能研究的 RNA

非同位素标记的 RNA

合成基因表达实验的反义 RNA

合成基因靶向功能的 gRNA

 

组分

RM101 (5,000 U)

T7 RNA Polymerase (50 U/μl)

100 μl

10 × T7 Transcription Buffer

100 μl
Activator
50 μl

-20℃保存,于-20 ~ 0℃运输。避免反复冻融。

核酸外切酶残留检测:200 U本品和50 pmol单链DNA底物在37℃下孵育16 h,经变性PAGE电泳,DNA的电泳谱带不发生变化。

核酸内切酶残留检测:200 U 本品和 0.5 μg 质粒DNA37℃下孵育4 h,经琼脂糖凝胶电泳,质粒的电泳谱带不发生变化。

RNase 残留检测:200 U的本品和1 μg RNA37℃下孵育 30 min,经琼脂糖凝胶电泳,RNA的电泳谱带不发生变化。

1. 使用本试剂时,请穿戴实验服、一次性乳胶手套、一次性口罩、使用 RNase-free 耗材,避免RNase污染。

2. 建议纯化Template DNA,避免RNaseRNA及蛋白残留。

3. 进行体外转录合成RNA时,本产品不仅适用于含有T7 Promoter的线型 Plasmid,也适用于带有T7 Promoter序列的PCR产物及Oligo DNA等。

4. 反应体系中可添加RNasin (ATG#RR101) 防止RNase污染,建议使用浓度 1 U/μl

5. 若要除去模板DNA,可配合本司产品DNase I (ATG#E103) (RNase-free) 除去,详见产品说明书(ATG#RM201) (ATG#E103)

关键词:
T7 RNA Polymerase
疫苗用酶
RM101
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