生物试剂
产品简介
Endonuclease IV(Nfo)货号: E303,来源于 E.coli,参与 DNA 损伤修复。该酶可识别双链 DNA 分子上的 apurinic/apyrimidinic (脱嘌呤/脱嘧啶)位点, 简称 AP 位点; 并切割 AP 位点 5′端的第一 个磷酸二酯键, 产生 3′-羟基和 5′-脱氧核糖磷酸; Nfo 还具有 3′-二酯酶活性, 能从 DNA 的 3′ 末 端释放磷酸甘油醛、完整的脱氧核糖 5′ -磷酸和磷酸。该酶还具有 3′-5′的外切酶活性。本制品可 与本公司等温扩增系列产品同步使用。
单位定义
在 10µl 的总反应体积中,37°C 孵育 1h,切割 1 pmol 含有单个 AP 位点*的 34bp 寡核苷酸双链所 需的酶量定义为 1 个活性单位 (U)。
AP 位点是在 10 pmol 的 34bp 含有单个尿嘧啶残基的寡核苷酸双链中加入 1U 单位的 UDG 酶, 37°C 反应 2min 获得。
产品组成
组 分 |
E303 |
Endonuclease IV (Nfo) (10U/μl) |
100 μl |
10 ×Nfo Buffer |
1 ml |
质量控制
核酸内切酶残留检测: 20 μl 反应体系, 10 U 本品和 1 μg PUC19 ,37℃温育 4 h,DNA 的电泳谱 带无变化。
大肠杆菌残留 DNA 残留检测: 50 μl 体系中, 以 ddH2O 为模板, 扩增 E. coli 16 s rDNA 基因。 30 个循环后进行 1%琼脂糖凝胶电泳,染色, 无扩增条带。
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