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产品简介
Endonuclease IV (Nfo) 来源于 E.coli，参与 DNA 损伤修复。该酶可识别双链 DNA 分 子上的apurinic/apyrimidinic (脱嘌呤/脱嘧啶) 位点，简称 AP 位点；并切割 AP 位点 5′端的第一个磷酸二酯键，产生 3′-羟基和 5′-脱氧核糖磷酸；Nfo 还具有 3′-二酯酶活性，能从 DNA 的 3′末端释放磷酸甘油醛、完整的脱氧核糖 5′-磷酸和磷酸。该酶还具有 3′-5′的外切酶活性。本制品可与本公司等温扩增系列产品同步使用。
单位定义
在 10 µl 的总反应体积中，37℃孵育 1 h，切割 1 pmol 含有单个 AP 位点的 34 bp 寡核苷酸双链所需的酶量定义为 1 个活性单位 (U)。
AP 位点是在 10 pmol 的 34 bp 含有单个尿嘧啶残基的寡核苷酸双链中加入 1 U 单位的 UDG 酶，37℃反应 2 min 获得。
产品组成
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组分
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E303
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Endonuclease IV (Nfo) (100 U/μl)
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100 μl
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10 × Nfo Buffer
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1 ml
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储存条件
-20℃保存，于-20 ~ 0℃运输。▲避免反复冻融。
质量控制
核酸外切酶残留检测：
20 U 本品和 0.6 μg λ-HindIII 在 74℃下孵育 1 h，DNA 的电泳谱带不发生变化。
核酸内切酶残留检测：
20 μl 反应体系，10 U 本品和 1 μg λDNA，37℃温育 4 h，DNA 的电泳谱带无变化。
RNase 残留检测：
20 U 本品和 1 μg Hela 细胞总 RNA 在 37℃下孵育 30 min，RNA 的电泳谱带不发生变化。
大肠杆菌残留 DNA 残留检测：
50 μl 体系中，以 ddH2O 为模板，扩增 E.coli 16s rDNA 基因。30 个循环后进行 1%琼脂糖凝胶电泳，染色，无扩增条带。
关键词:
Endonuclease Ⅳ(Nfo)
核酸内切酶
Nfo
Nfo核酸酶
核酸酶
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