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产品简介
Exonuclease III (Exo III),来源于 E.coli,是一种 3'到 5'的核酸外切酶,可以从平末端、5'突出端或缺口处降解 dsDNA,从 DNA 链的 3'端逐步释放 5'单核苷酸,产生单链 DNA 片段。其在 DNA 3'突出端 (至少四个碱基长,且不带有 3'末端 C-残基)、单链 DNA 或硫代磷酸酯连接的核苷酸上不具活性。Exo III 还具有以下三种酶活性:3'磷酸酶活性:切除 3'末端的磷酸基团,产生 3'OH 基团;RNase H 活性:以核酸外切方式降解 RNA-DNA 杂交体中的 RNA 链;AP-内切核酸酶活性:切割脱嘌呤或脱嘧啶位点 (AP 位点) 的磷酸二酯键,产生 5'端无碱基的脱氧核糖 5'磷酸残基。本制品可与本公司等温扩增系列产品同步使用。
产品组成
组分
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E302
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Exonuclease III (Exo III) (100 U/μl)
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25 μl
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10 × Exo III Buffer
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250 μl
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储存条件
-20℃保存,于-20 ~ 0℃运输。▲避免反复冻融。
质量控制
核酸外切酶残留检测:
20 U 本品和 0.6 μg λ-HindIII 在 74℃下孵育 1 h,DNA 的电泳谱带不发生变化。
核酸内切酶残留检测:
20 μl 反应体系,10 U 本品和 1 μg λDNA,37℃孵育 4 h,DNA 的电泳谱带无变化。
RNase 残留检测:
20 U 本品和 1 μg Hela 细胞总 RNA 在 37℃下孵育 30 min,RNA 的电泳谱带不发生变化。
大肠杆菌残留 DNA 残留检测:
50 μl 体系中,以 ddH2O 为模板,扩增 E.coli 16s rDNA 基因。30 个循环后进行 1%琼脂糖凝胶电泳,染色,无扩增条带。
关键词:
EXO Ⅲ
Exonuclease III
核酸外切酶
核酸酶
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