生物试剂
【P104-3】2 × Taq Master Mix for PAGE(Dye)
本产品包含最新升级版的 Taq DNA Polymerase,比普通 Taq 酶具备更高的保真度。Mix 中混合有 dNTP 以 及优化的缓冲体系,只需加入引物和模板即可进行扩增,减少了移液操作,提高了通量和结果的重现性。 体系中加入的保护剂使得 Master Mix 经过反复冻融后仍可保持稳定的活性。PCR 产物的 3’端带 A,可克 隆至 T 载体,并适用于本公司 CloneUFO®快速克隆试剂盒。专用于聚丙烯酰胺凝胶检测。
组 分 |
P104-3(5 ml)
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P104-3(15 ml)
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P104-3(50 ml)
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2 × Taq Mix for PAGE (Dye)
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5 ml
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15 ml
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50ml
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-20℃保存,于-20 ~ 0℃运输。▲避免反复冻融。
核酸内切酶残留检测:20 μl 反应体系,10 U 本品和 1 μg λDNA,37℃温育 4 h,DNA 的电泳谱带无变化。
RNase 残留检测:20U 本品和 1 μg Hela 细胞总 RNA 在 37℃下孵育 30min,RNA 的电泳谱带不发生变化。
大肠杆菌残留 DNA 残留检测:50 μl 体系中,以 ddH2O 为模板,扩增 E. coli 16 s rDNA 基因。30 个循环后 进行 1%琼脂糖凝胶电泳,染色,无扩增条带。
功能检测:以 10 ng λDNA 为模板扩增 30 个循环,1%琼脂糖凝胶电泳,染色,可见各自单一的目的条带。
2. 引物 3’端最后 8 个碱基应避免出现连续错配;
3. 引物 3’端尽量避免出现发夹结构;
4. 引物 Tm 值控制在 55°C-65°C 之间;
5. 引物额外附加序列,即与模板非配对序列,不应参与引物 Tm 值计算;
6. 引物 GC 含量控制在 40%-60%之间;
7. 正向引物和反向引物 Tm 值以及 GC 含量尽可能一致。
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