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产品简介
DpnI 来源于携带从肺炎双球菌 G41 克隆的 DpnI R 基因的大肠杆菌。DpnI 限制性内切酶可有效识别并切断腺嘌呤甲基化的 GmATC,而不能切断非甲基化的 GATC 序列。能够切断来源于常用 E.coli (dam+) 的DNA,不能切断 PCR 产物,不受 dam mathylase 影响。该产品可广泛应用于分子克隆、基因分型、DNA 印迹、RFLP 技术、SNP 等多项技术领域。
酶切位点
5' G Am6 ↓ T C 3'
3' C T ↑ Am6 G 5'
产品组成
组成
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E101 (500 U)
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E101 (1,000 U)
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DpnI (10 U/μl)
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50 μl
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100 μl
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10 × Dpn Buffer
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500 μl
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1 ml
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储存条件
-20℃保存,于-20 ~ 0℃运输。▲避免反复冻融。
质量控制
RNase 残留检测:
20 U 本品和 1 μg Hela 细胞总 RNA 在 37℃下孵育 30 min,RNA 的电泳谱带不发生变化。
大肠杆菌残留 DNA 残留检测:
50 μl 体系中,以 ddH2O 为模板,扩增 E.coli 16s rDNA 基因。30 个循环后进行 1%琼脂糖凝胶电泳,染色,无扩增条带。
注意事项
❖ DpnI 需要在识别序列中存在N6甲基腺嘌呤。
❖ DpnI 只会切割完全腺苷甲基化的位点。半腺苷甲基化的 dam 位点 DpnI 的分裂速度慢 60 倍。
❖ DpnI、Bsp143I 和 MboI 都识别同一序列,但甲基化敏感性和裂解位点不同。
关键词:
Dpn I
核酸酶
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