生物试剂
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产品介绍
CloneUFO® One Step Cloning 技术是一种快速 Fast、高效 Efficient、简便 Easy 的 DNA 定向克隆技术，可将目的基因的 PCR 产物定向克隆至任意载体的任意位点。CloneUFO® One Step Cloning 试剂盒是T4 噬菌体某基因进行异源表达获得的重组酶为核心的全新一代重组克隆试剂盒，该试剂盒中包含有重组反应所需缓冲液和重组酶 UvsXase。UvsXase 能够兼容常规酶切、PCR 反应体系。克隆载体酶切产物或 PCR 产物和目的基因 PCR 产物可以不进行 DNA 纯化直接用于重组克隆，极大的简化了实验步骤。
基本步骤：将载体在克隆位点进行全质粒扩增，得到线性化载体；设计同源引物，使得目的片段 PCR 产物的 5’和 3’末端分别带有和预插入的线性化载体前后两末端完全一致的序列 (15 bp ~ 20 bp)；将扩增好的目的基因 PCR 产物和线性化载体按一定比例混合后，在 UvsXase 的催化下，仅需反应 30 min 即可进行转化，完成定向克隆。克隆阳性率可达 95%以上。
产品特点
-简单、快速、高效
-适用于向几乎任何载体的任何位点进行定向克隆
-无需考虑载体和目的基因片段上的酶切位点
-可高效克隆 50 bp ~ 10 kb 片段
-线性化载体和 PCR 产物可不进行纯化直接克隆
-不依赖于连接酶及磷酸酶，克隆阳性率可达 95%以上
产品应用
-快速克隆
-无缝克隆
-高通量克隆
-DNA 定点突变
产品组成
| 组成 | C101 ( 25 rxns ) | C101 ( 50 rxns ) |
| UvsXase® | 50 μl | 100 μl |
| 5 × UFO Buffer | 100 μl | 200 μl |
储存条件
-20℃保存，于-20 ~ 0℃运输。▲避免反复冻融。
实验流程图
实验方案
实验案例
使用案例一：上海交大微生物代谢国重室 分子酶学实验室
使用单片段一步克隆试剂盒：CloneUFO® One Step Cloning Kit
以上为单片段克隆结果
使用案例二：上海交大微生物代谢国重室 用单片段一步克隆试剂盒：CloneUFO® One Step Cloning Kit进行酶蛋白基因合成
其他使用案列：南昌大学中德联合研究院、吉林大学昆虫实验室、南京大学、南京农业大学等。
关键词:
CloneUFO® One Step Cloning Kit
重组酶
重组
克隆
重组克隆
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