MutUFO™ Fast Mutagenesis Kit——快速定点突变试剂盒
- 分类:企业新闻
- 发布时间:2019-07-12 11:56
【概要描述】MutUFO™Fast Mutagenesis Kit是基于CloneUFO™快速克隆技术的定点突变系统。使用本试剂盒,目标质粒扩增产物经胶回收或DpnI消化、CloneUFO™重组环化后直接进行转化即可完成定点突变。该试剂盒由两个模块组成:Proofast™ Super-Fidelity DNA Polymerase扩增模块和CloneUFO™快速克隆模块。
MutUFO™ Fast Mutagenesis Kit——快速定点突变试剂盒
【概要描述】MutUFO™Fast Mutagenesis Kit是基于CloneUFO™快速克隆技术的定点突变系统。使用本试剂盒,目标质粒扩增产物经胶回收或DpnI消化、CloneUFO™重组环化后直接进行转化即可完成定点突变。该试剂盒由两个模块组成:Proofast™ Super-Fidelity DNA Polymerase扩增模块和CloneUFO™快速克隆模块。
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- 发布时间:2019-07-12 11:56
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MutUFO™
Fast Mutagenesis Kit
产品简介
MutUFO™Fast Mutagenesis Kit是基于CloneUFO™快速克隆技术的定点突变系统。使用本试剂盒,目标质粒扩增产物经胶回收或DpnI消化、CloneUFO™重组环化后直接进行转化即可完成定点突变。该试剂盒由两个模块组成:Proofast™ Super-Fidelity DNA Polymerase扩增模块和CloneUFO™快速克隆模块。
Proofast™超高的保真度显著降低了扩增过程中引入新突变的可能性,由于模板使用量极低,有利于原始甲基化模板的彻底降解。其卓越的长片段扩增能力,广泛适用于长度小于20 kb的任何质粒扩增。CloneUFO™快速克隆系统利用高效的同源重组反应,使得MutUFO™定点突变试剂盒进行DNA定点突变时,线性化PCR产物能够高效环化,利于转化宿主,提高突变效率。
完美优化的反应缓冲液、快捷的操作流程以及优异的定点突变效率,使得MutUFO™ Fast MutagenesisKit成为DNA定点突变首选试剂盒。
产品组成
组分 | 货号 | 20 rxn |
Proofast™ Max Super-Fidelity DNA Polymerase | P202-A | 40 μL |
2ⅹProofast Max Buffer | P202-B | 1 mL |
UvsXase™ | C101-A | 40 μL |
5ⅹUFO Buffer | C101-B | 250 μL |
储存条件
-20°C保存。
实验流程
1)引物设计
向质粒引入单碱基或连接多碱基定点突变,只需设计一对引物将质粒进行反向PCR扩增即可。引物设计原则为:正反向扩增引物5’端包含15-21 bp反向互补区域(GC含量40%-60%为佳),各引物非互补区域长度至少为15 bp(待突变位点至引物3’端区域Tm值高于60℃为佳)。
注意:计算引物Tm值时,应计算待突变位点至引物3' 端这一区域内的碱基,调整引物长度使这一段Tm值高于60℃,待突变位点至引物5' 端区域内的碱基不应参与计算。
2)突变质粒扩增
请选用Proofast™ Max Super-Fidelity DNA Polymerase扩增长片段质粒,详细操作参见:Proofast™ 超高保真聚合酶说明书
3)扩增产物胶回收或DpnI消化,去除模板
4)进行重组反应
5)反应产物转化、涂板、克隆鉴定
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